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奧地利 K&N（KRAUS & NAIMER）考爾斯和藍(lán)默爾集團(tuán)在1907年成立于奧地利的維也納，公司創(chuàng)始人是法蘭茲·考爾斯和羅倫茲·藍(lán)默爾，其制造的產(chǎn)品被冠以的“藍(lán)系列”商標(biāo)。

目前集團(tuán)擁有六家工廠：奧地利K&N、美國K&N、德國K&N、新西蘭K&N、巴西K&N、愛爾蘭K&N。

轉(zhuǎn)換開關(guān)，接觸器和馬達(dá)啟動器的發(fā)展，是基于考爾斯和藍(lán)默爾在設(shè)計及生產(chǎn)電器開關(guān)超過七十五年的經(jīng)驗，考爾斯和藍(lán)默爾引進(jìn)這種凸輪操作開關(guān)，并逐漸被人們所認(rèn)識，成為了世界上生產(chǎn)這類開關(guān)的先驅(qū)。

常見型號：

CG4  CG4-1 CA10  CA10B  CA11  CA11B  CA20  CA20B  CH10  CH20  CH11  C26  C32  C42  C43  C80  C125  C316  C315 L350  L351  L400  L600  L630  L631  L800  L1000  L1001  L1200  L1250  L1251  L1600  L2000  CAD11  CAD12  KG10B  KG20B  KG32B  KG41B  KG64B  KG80  KG80C  KG100  KG100C  KG10A  KG20A  KG32A

  作用機(jī)制：  

潮霉素B是由吸水鏈霉菌（Streptomyces hygroscopicus）代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素，通過抑制蛋白質(zhì)合成而殺死細(xì)菌、真菌和高等真核細(xì)胞。潮霉素B通過干擾70S核糖體易位和誘導(dǎo)對mRNA模板的錯讀而抑制蛋白合成。目前常用于篩選和維持培養(yǎng)含潮霉素抗性基因的原核或真核細(xì)胞。 

抗性基因： 

對潮霉素B的抗性源自編碼潮霉素B磷酸轉(zhuǎn)移酶（Hph）的基因。至今發(fā)現(xiàn)兩種來源： 

► Streptomyces hygroscopicus產(chǎn)生的Hph抗性基因；

► Escherichia coli，Klebsiella pneumoniae內(nèi)質(zhì)粒攜帶的Hph抗性基因（常用）；  

生物應(yīng)用： 

1）   篩選和維持培養(yǎng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Hph⁺載體的原核細(xì)胞或真核細(xì)胞（植物細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞）； 

2）   由于作用模式的差異，常與G418 （Geneticin^TM），Zeocin™ 和blasticidin S聯(lián)合使用，篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩個不同載體的細(xì)胞株；

3）抗病毒劑，由于潮霉素B選擇性滲透進(jìn)入因病毒感染增強(qiáng)通透性的細(xì)胞，而且具有抑制翻譯的功效；

4）作為驅(qū)蟲藥加入動物飼料； 

應(yīng)用濃度： 

潮霉素B用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化。推薦使用濃度為50-1000 μg/mL，最佳濃度需要?dú)缜€來確定。 

哺乳動物細(xì)胞·200-500 μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞·100-300 μg/mL；真菌·300-1000 μg/mL； 

產(chǎn)品使用：

使用一：殺滅曲線確定最佳殺死濃度（僅作參考，因個人檢測體系而異）

（1）往組織培養(yǎng)級的96孔板內(nèi)加入未轉(zhuǎn)染細(xì)胞，細(xì)胞密度約50-200細(xì)胞/孔；細(xì)胞貼壁之后，往每孔加入含不同濃度（如50-1000μg/mL，至少5個濃度）潮霉素B的200μL新鮮培養(yǎng)基；

（2）37℃，5% CO₂培養(yǎng)箱孵育細(xì)胞10-14天；

（3）培養(yǎng)5-7天后更換新的培養(yǎng)液，培養(yǎng)液內(nèi)含有相應(yīng)濃度的潮霉素B；

（4）10-14天后使用細(xì)胞增殖方法如MTT，CCK-8等評估細(xì)胞活力；也可以通過檢測細(xì)胞克隆數(shù)或百分比匯合率來確定毒性效應(yīng)。一般選擇在10-14天能夠殺死所有細(xì)胞的最小濃度為最佳篩選濃度。

使用二：篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞

（1）         對于貼壁細(xì)胞，直接吸去60mm培養(yǎng)皿內(nèi)的轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)基，然后加入含有潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基5-6ml；對于懸浮細(xì)胞，無菌條件250x g,離心10min除去舊的轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)基，然后懸浮在約5ml的含潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基；

（2）         5-7天后，如上方法更換含有潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基；

（3）         再孵育細(xì)胞5-7天；

（4）         10-14天孵育后，培養(yǎng)體系中只含有能夠表達(dá)潮霉素B抗性表型的活細(xì)胞。因此篩選之后如步驟一，更換不含潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基。